998 resultados para Cromossomo X Teses
Resumo:
A Deficincia Intelectual (DI) uma condio definida como um funcionamento intelectual significativamente prejudicado, expresso juntamente com limitaes em pelo menos duas reas do comportamento adaptativo que se manifestam antes dos 18 anos de idade. A prevalncia estimada da DI na populao em geral de 2-3% e um nmero expressivo de casos permanece sem um diagnstico definitivo. H um consenso geral de que a DI mais comum em indivduos do sexo masculino em relao aos do sexo feminino. Entre as explicaes para este excesso est a concentrao de genes especficos para a habilidade cognitiva no cromossomo X. MicroRNAs (miRNAs) so pequenas molculas de RNA no codificador que modulam a expresso gnica ps-transcricional de RNAs mensageiros alvo. Recentemente, estudos tm demonstrado a importncia essencial dos miRNAs para o desenvolvimento e funcionamento cerebrais e sabe-se que o cromossomo X tem uma alta densidade de genes de miRNAs. Neste contexto, os miRNAs so candidatos potenciais como fatores genticos envolvidos na Deficincia Intelectual Ligada ao X (DILX). Neste estudo, foram analisadas as regies genmicas de 17 genes de miRNAs expressos no crebro localizados no cromossomo X, com o objetivo de investigar o possvel envolvimento de variantes na sequncia destes miRNAs na DILX. Para este fim, selecionamos amostras de DNA genmico (sangue perifrico) de 135 indivduos do sexo masculino portadores de DI sugestiva de DILX de um grupo de mais de 1.100 pacientes com DI encaminhados ao Servio de Gentica Humana da UERJ. O critrio de incluso para este estudo era de que os probandos apresentassem um ou mais parentes do sexo masculino afetados pela DI que fossem interligados por via materna. As amostras de DNA dos pacientes foram amplificadas utilizando a tcnica de reao em cadeia da polimerase, seguida por purificao e sequenciamento direto pelo mtodo de Sanger dos fragmentos amplificados. Para avaliar a conservao dos 17 miRNAs foi realizada uma anlise filogentica in silico incluindo sequncias dos miRNAs selecionados de humanos e de outras 8 espcies de primatas estreitamente relacionadas. No foram encontradas alteraes nas sequncias nos genes de 17 miRNAs analisados, mesmo diante do padro gentico altamente heterogneo da populao brasileira. Adicionalmente, a anlise filogentica destes miRNAs revelou uma alta conservao entre as espcies comparadas. Considerando o papel dos miRNAs como reguladores da expresso gnica, a ausncia de alteraes e a alta conservao entre primatas sugerem uma forte presso seletiva sobre estas molculas, reforando a sua importncia funcional para o organismo em geral. Apesar de no termos encontrado variantes de sequncia nos miRNAs estudados, o envolvimento de miRNAs na DI no pode ser completamente descartado. Alteraes fora da molcula de miRNA precursor, nos fatores de processamento, nos stios alvo e variaes no nmero de cpias de genes de miRNAs podem implicar em alterao na expresso dos miRNAs e, consequentemente, na funcionalidade do miRNA maduro. Sendo assim, uma anlise sistemtica da expresso de miRNAs em pacientes com DILX urgentemente necessria, a fim de desvendar novos genes/mecanismos moleculares relacionados a esta condio.
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A cytogenetic study of 22 mares with fertility has showed that four of them had 63,X/64,XX mosaicism. The X-chromosome has presented the expected interstitial heterochromatic C - banding located in the long arm, besides of the usual centromeric band. The great variation of clinic signs observed in mares with mosaicism, could be due to the type of zygote or the time the mosaicism occured.
Resumo:
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
Resumo:
Ps-graduao em Medicina Veterinria - FMVZ
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES)
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Ps-graduao em Medicina Veterinria - FMVZ
Resumo:
Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq)
Resumo:
O retardo mental (RM) caracterizado por um funcionamento intelectual significantemente abaixo da mdia (QI<70). A prevalncia de RM varia entre estudos epidemiolgicos, sendo estimada em 2-3% da populao mundial, constituindo assim, um dos mais importantes problemas de sade pblica. H um consenso geral de que o RM mais comum no sexo masculino, um achado atribudo s numerosas mutaes nos genes encontrados no cromossomo X, levando ao retardo mental ligado ao X (RMLX). Dentre os genes presentes no cromossomo X, o Jumonji AT-rich interactive domain IC (JARID1C) foi recentemente identificado como um potencial candidato etiolgico do RM, quando mutado. O JARID1C codifica uma protena que atua como uma desmetilase da lisina 4 da histona H3 (H3K4), imprescindvel para a regulao epigentica. To recente como a identificao do gene JARID1C, a descoberta de que mudanas no nmero de cpias de sequncias de DNA, caracterizadas por microdelees e microduplicaes, poderiam ser consideradas como razes funcionalmente importantes de RMLX. Atualmente, cerca de 5-10% dos casos de RM em homens so reconhecidos por ocorrerem devido a estas variaes do nmero de cpias no cromossomo X. Neste estudo, investigamos mutaes no gene JARID1C, atravs do rastreamento dos xons 9, 11, 12, 13, 15 e 16, em 121 homens de famlias com RM provavelmente ligado ao X. Paralelamente, realizamos a anlise da variao do nmero de cpias em 16 genes localizados no cromossomo X atravs da tcnica de MLPA no mesmo grupo de pacientes. Esta metodologia consiste em uma amplificao mltipla que detecta variaes no nmero de cpias de at 50 sequncias diferentes de DNA genmico, sendo capaz de distinguir sequncias que diferem em apenas um nucleotdeo. O DNA genmico foi extrado a partir de sangue perifrico e as amostras foram amplificadas pela tcnica de PCR, seguida da anlise por sequenciamento direto. Foram identificadas trs variantes na sequncia do gene JARID1C entre os pacientes analisados: a variante intrnica 2243+11 G>T, que esteve presente em 67% dos pacientes, a variante silenciosa c.1794C>G e a mutao indita nonsense c.2172C>A, ambas presentes em 0,82% dos indivduos investigados. A anlise atravs do MLPA revelou uma duplicao em um dos pacientes envolvendo as sondas referentes ao gene GDI1 e ao gene HUWE1. Este trabalho expande o estudo de mutaes no gene JARID1C para a populao brasileira erefora a importncia da triagem de mutaes neste gene em homens portadores de RM familiar de origem idioptica, assim como, primeiro relato cientfico relativo investigao de variaes no nmero de cpias de genes localizados no cromossomo X em homens brasileiros com RM, atravs da tcnica de MLPA.
Resumo:
Novas metodologias de anlise molecular voltadas para estudos populacionais, clnicos, evolutivos, da biodiversidade e identificao forense foram desenvolvidas com base em marcadores microsstelites ou STR Short Tandem Repeats. Os marcadores STR, que esto amplamente espalhados nos genomas e se caracterizam por apresentar alto grau de polimorfismo, podem ser analisados a partir da amplificao por PCR (Reao em Cadeia da polimerase). A anlise foi facilitada a partir do desenvolvimento de sistemas de amplificao simultnea de mltiplos STR (multiplex STR) e com a deteco automatizada dos produtos de amplificao marcados por fluorescncia. Recentemente, o uso de marcadores STR do cromossomo X (X-STR) tornou-se significativo na prtica forense. Devido ao seu modo de transmisso, os X-STR so teis em situaes particulares de investigao de relaes de parentesco, apresentando vantagens sobre o uso de STR autossmicos. Este estudo teve como principal objetivo o desenvolvimento e validao de sistema multiplex, denominado LDD (X-STR) Decaplex, capaz de amplificar dez loci X-STR (DXS7133, DXS7424, DXS8378, DXS6807, DXS7132, DXS10074, DXS7423, DXS8377, GATA172D05 e DXS10101) para aplicao em gentica populacional, identificao e anlises forenses. Utilizando o LDD (X-STR) Decaplex 170 indivduos autodenominados afrodescendentes, no aparentados geneticamente, foram genotipados. As freqncias allicas e genotpicas no apresentaram desvio do equilbrio de Hardy-Weinberg e esto em concordncia com aquelas observadas em outros estudos. Os hapltipos observados foram nicos em indivduos de amostra masculina. A anlise de desequilbrio de ligao no revelou associao entre os marcadores X-STR. A diversidade gentica foi elevada, variando entre 0,6218 para o locus DXS7133 a 0,9327 para o locus DXS8377. Os parmetros de Probabilidade de Vinculao (PV), ndice de Vinculao (IV), Poder de Excluso (PE), Poder de Discriminao e Razo de Verossimilhana foram tambm elevados, demonstraram que os dez X-STRs so altamente polimrficos e discriminativos na populao estudada. A concentrao mnima de DNA para a amplificao dos loci do LDD (X-STR) Decaplex de 0,5 ng e verificamos que amplificao por PCR pode ser afetada quando so adicionados mais de 5 ng de DNA nas reaes. Os percentuais de bandas stutter foram elevados para os loci DXS7132 e DXS8377. No teste de reprodutibilidade observamos consistncia entre as tipagem de diferentes amostras biolgicas, incluindo as de restos mortais. No teste de mistura a proporo limite em que observamos a coexistncia de duas espcies biolgicas foi de 2,5:1ng (feminino-masculino). Os resultados evidenciaram que os loci do LDD (X-STR) Decaplex so altamente informativos, consistindo, em conjunto, uma ferramenta importante em estudos de identificao humana e de relaes de parentesco.
Resumo:
Marcadores genticos presentes no cromossomo Y, como os microssatlites (Y-STRs) e polimorfismos de nico nucleotdeo (Y-SNPs) so utilizados na caracterizao de linhagens masculinas, visto que so transmitidos s geraes seguintes sem alteraes, a menos que ocorram mutaes (Singh et al., 2011; Mitchell & Hammer, 1996; Butler, 2009). Por isso, esses marcadores so amplamente empregados em diversas situaes, destacando-se o uso constante dos Y-STRs na gentica forense por apresentarem alta capacidade de discriminar linhagens. Recentemente, foram descritos 13 marcadores com taxas de mutao substancialmente superiores quelas verificadas para loci STR do cromossomo Y, denominados Rapidly Mutating (RM) Y-STRs (Ballantyne et al., 2010; Kayser et al., 2012). Devido s taxas de mutao elevadas, os RM-YSTRs apresentam maior eficincia na discriminao entre indivduos proximamente relacionados, pertencentes mesma linhagem patrilnea. O presente trabalho buscou aprofundar o conhecimento acerca das caractersticas populacionais e mutacionais dos loci RM-YSTRs em amostra do Rio de Janeiro, contribuindo com estudos desta natureza na populao brasileira. Realizou-se a anlise de 13 loci do cromossomo Y em 258 indivduos do sexo masculino, compondo 129 pares de pais e filhos, nascidos no estado do Rio de Janeiro. O DNA das amostras foi extrado, conforme os protocolos vigentes na rotina do LDD-UERJ. As sequncias genticas de interesse foram amplificadas pela tcnica de reao em cadeira da polimerase (PCR) atravs da realizao de trs PCR multiplex, cujos produtos de amplificao foram separados por eletroforese em sequenciador automtico ABI-3500 (Applied Biosystems). Para os pares pai/filho que apresentaram hapltipos mutados, empregou-se a tcnica de sequenciamento para confirmao das mutaes. Os loci RM-YSTR geraram um poder de discriminao de 1,0 na amostra analisada, o que significa que todos os 129 indivduos da amostra populacional apresentaram hapltipos diferentes para tais marcadores, com frequncias de 0,0077 e diversidade haplotpica igual a 1. Alm disso, foram obtidos valores elevados de diversidade gnica para os 13 marcadores. A anlise de distncia gentica e os resultados de AMOVA baseados nos valores de Fst demonstraram que os RM-YSTR no indicam subdiviso populacional e traos ancestrais comuns. Tais valores esto associados s elevadas taxas de mutao encontradas, cuja mdia foi de 2,11 x 10-2. Foi possvel observar que os loci RM-YSTR so muito discriminativos na amostra miscigenada analisada, alm de terem maior capacidade de diferenciar indivduos do que outros conjuntos de marcadores normalmente usados em estudos populacionais e anlises forenses. Sendo assim, possvel concluir que os marcadores RM-YSTR so promissores para discriminar indivduos da mesma linhagem patrilnea, visto que devido s suas elevadas taxas mutacionais e poder de discriminao, so capazes de diferenciar indivduos de maneira mais eficiente do que os outros conjuntos de STR. Porm, necessrio maior nmero de estudos para melhor caracterizao destes loci em diferentes populaes.
Resumo:
A Deficincia Intelectual (DI) uma condio complexa, que acomete 2-3% da populao mundial, constituindo um importante problema de sade pblica. No entanto, uma parcela significativa dos casos de DI permanece sem um diagnstico definitivo, o que demonstra que muitos fatores etiolgicos associados a esta condio ainda precisam ser elucidados. H um consenso de que o nmero de homens com DI supera em 30% o nmero de mulheres, um achado atribudo presena de mutaes em genes localizados no cromossomo X. Dentre os genes presentes neste cromossomo que so expressos no crebro, o Jumonji AT-rich interactive domain 1C (JARID1C) foi identificado como um potencial candidato a estar relacionado DI ligada ao X (DILX). O gene JARID1C codifica uma desmetilase da lisina 4 da histona H3 (H3K4), imprescindvel para a regulao epigentica. To importante quanto o estudo do gene JARID1C em pacientes com DI a busca por variaes no nmero de cpias gnicas (VNCs) em regies cromossmicas subtelomricas. Genes relacionados ao desenvolvimento cerebral so enriquecidos em VNCs e as regies subtelomricas so mais susceptveis formao destes rearranjos. Diante do exposto, neste estudo, investigamos mutaes no gene JARID1C (exons 3, 4, 5, 8, 10, 14 e 23) em 148 homens portadores de DI pertencentes a famlias com padro de segregao sugestivo de DILX. Paralelamente, analisamos VNCs subtelomricas em 174 homens com DI familiar de etiologia idioptica, independente do padro de segregao. Para todos os indivduos selecionados, amostras de DNA genmico foram extradas a partir de sangue perifrico e alteraes genticas frequentemente relacionadas DI foram previamente excludas (expanses trinucleotdicas nos loci FRAXA e FRAXE e mutaes nos genes MECP2 e ARX). A anlise do gene JARID1C foi realizada pela tcnica de PCR, seguida da anlise dos produtos amplificados por sequenciamento. Foram identificadas quatro variantes silenciosas (c.564G>A, c.633G>C, c.1884G>A, c.1902C>A). Atravs da anlise in silico de sequncias exnicas acentuadoras de splicing (ESEs) localizadas nas posies das variantes encontradas, foi possvel classificar a variante c.1884G>A como neutra e as trs variantes restantes como possveis criadoras de ESEs. J para a investigao das VNCs subtelomricas, foi utilizada a metodologia de Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA), capaz de identificar microdelees e microduplicaes nas 46 regies subtelomricas. Para este fim, inicialmente, os indivduos foram investigados pelo kit de MLPA P036, enquanto que para aqueles que exibiram alteraes tambm foi utilizado o kit P070. A validao das VNCs encontradas foi realizada por PCR quantitativo em Tempo Real. A anlise por MLPA revelou um indivduo apresentando duas delees (9p e 13q), um indivduo apresentando duas amplificaes (1p e 2p), dois indivduos apresentando uma deleo e uma amplificao (18p e 18q; 4p e 8p), quatro indivduos portadores de uma deleo cada (10p, 20p, 3q e 22q) e dois indivduos com uma amplificao cada (7q e 20p). Algumas das alteraes subtelomricas encontradas (2,87%) representam VNCs de relevncia clnica para o estudo da DI, reforando a importncia do rastreamento de rotina de VNCs subtelomricas na DI familiar. Consideramos que a elucidao de novos genes ou mecanismos moleculares diretamente relacionados DI um caminho promissor e urgente para o estabelecimento de novas estratgias teraputicas possveis.
Resumo:
A adrenoleucodistrofia ligada ao cromossomo X (X-ALD) uma doena peroxissomal bioquimicamente caracterizada pelo acmulo de cidos graxos de cadeia muito longa (Very Long Chain Fatty Acids - VLCFA), principalmente os cidos hexacosanico (C26:0) e tetracosanico (C24:0), em diferentes tecidos e fluidos orgnicos. A doena clinicamente caracterizada por progressiva desmielinizao central e perifrica e insuficincia adrenal. Os mecanismos exatos do dano cerebral na X-ALD so pouco conhecidos. O tratamento usual para X-ALD com a mistura gliceroltrioleato/gliceroltrierucato na proporo 4:1, conhecido como leo de Lorenzo (OL), em combinao com uma dieta de restrio dos VLCFA normaliza os nveis de VLCFA, mas em pacientes sintomticos os sintomas neurolgicos persistem ou progridem. Os radicais livres parecem estar envolvidos em um grande nmero de enfermidades no ser humano, tais como nas doenas neurodegenerativas (como doena de Parkinson, doena de Alzheimer e esclerose mltipla), nas doenas crnico-inflamatrias, nas doenas vasculares e no cncer. Considerando que a gerao de radicais livres est envolvida em vrias desordens neurodegenerativas, no presente estudo foram avaliados vrios parmetros de estresse oxidativo em plasma, eritrcitos e fibroblastos de pacientes sintomticos com X-ALD. Tambm foi avaliado o efeito do tratamento com OL sobre diferentes parmetros de estresse oxidativo em plasma e em eritrcitos de pacientes sintomticos e assintomticos com X-ALD tratados e no tratados com OL. Considerando que no possvel estudar estresse oxidativo em crtex cerebral de pacientes com X-ALD, foi avaliado o efeito in vitro da mistura VI cido oleico (C18:1)/cido ercico (C22:1) sobre diversos parmetros de estresse oxidativo em plasma e em eritrcitos humanos normais e em crtex cerebral de ratos adicionados dos cidos hexacosanico(C26:0) e tetracosanico (C24:0). Foi verificado um aumento significativo da quimiluminescncia e das espcies reativas do cido tiobarbitrico (TBA-RS), refletindo uma induo da peroxidao lipdica, bem como uma diminuio da reatividade antioxidante total (TAR) medida em plasma de pacientes sintomticos, indicando uma capacidade deficiente em rapidamente combater um aumento das espcies reativas. Tambm foi observado um aumento da atividade da glutationa peroxidase (GPx) em eritrcitos e das atividades da catalase (CAT) e da superxido dismutase (SOD) em fibroblastos dos pacientes sintomticos estudados. Estes dados sugerem que o estresse oxidativo pode estar envolvido na fisiopatologia da X-ALD. Verificamos tambm que o OL no reverteu o aumento do TBA-RS no plasma de indivduos X-ALD. A determinao de TAR no apresentou alteraes no plasma de pacientes X-ALD sintomticos e assintomticos antes e aps o tratamento com OL. A atividade das enzimas antioxidantes CAT, GPx e SOD no se mostrou alterada em eritrcitos destes pacientes tratados ou no com OL. Nos experimentos in vitro, foi constatado um aumento significativo da quimiluminescncia e de TBA-RS em plasma humano e em crtex cerebral de ratos adicionados dos cidos C26:0C24:0, porm a mistura C18:1/C22:1 no reverteu este efeito. A medida de TAR no se mostrou alterada em crtex cerebral de ratos adicionado de C26:0C24:0, bem como no foi modificada pela mistura C18:1/C22:1. Por outro lado, a adio de C26:0C24:0 em plasma humano diminuiu a medida de TAR, porm a mistura C18:1/C22:1 no alterou esse efeito. As atividades das enzimas antioxidantes CAT e GPx no foram alteradas em eritrcitos humanos e em crtex cerebral de ratos pela adio de C26:0C24:0 , nem pela mistura C18:1/C22:1. O mesmo foi observado na medida de SOD em eritrcitos humanos adicionados de C26:0C24:0. A medida da atividade da SOD em crtex cerebral de ratos apresentou um aumento significativo induzido por C26:0C24:0 , porm a presena da mistura C18:1/C22:1 no modificou este efeito. Estes resultados sugerem fortemente que o estresse oxidativo possa estar envolvido na fisiopatologia da X-ALD e que o tratamento com leo de Lorenzo no modifica estes parmetros de estresse oxidativo. Assim, novas estratgias teraputicas deveriam ser investigadas para pacientes de X-ALD.
Resumo:
Foram cariotipados 95 touros puros de origem, da raa Chianina, ditribuidos em 19 empresas pastoris, em 5 estados brasileiros. O objetivo foi investigar a incidncia de indivduos portadores de cromossomo Y acrocntrico, tpico das raas de Bos taurus indicus, face s especulaes de que as raas indianas poderiam ter contribuido para a formao do Chianina. Todos os indivduos avaliados mostraram o cromossomo Y de Bos taurrus taurus. O ndice centromrico obtido foi de 43,91%, o que permitiu classificar o centrmero deste cromossomo como localizado na regio mediana. Foram avaliados tambm 29 touros com o objetivo de verificar a presena do polimorfismo intraracial do cromossomo Y. O ndice centromrico e o tamanho relativo do Y foi determinado. O tamanho do cromossomo X serviu como base para estimar o tamano relativo do Y. A anlise de varincia mostrou diferenas entre touros apenas no tamanho relativo do Y, sendo que o ndice centromrico no difereiu entre os mesmos. Concluimos que este polimorfismo indica que a raa Chianina pode ter recebido contribuio de outras raas em passado remoto ou pode tambm indicar a possibilidade de cruzamentos mais recentes.
